目的 探讨巨噬细胞为适应肿瘤微环境（tumor micro-environment,TME）需要而在其自身极化层面上发生谱系变化模型的特征,为进一步研究TME中巨噬细胞的可塑性提供参考。
方法 取绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）转基因并已建成近交系的Foxn1nu.B6-CAG-EGFP/SU裸小鼠骨髓细胞,分别在巨噬细胞集落刺激因子1（colony-stimulating factor 1,CSF-1）、IFN-γ+LPS、IL-4诱导下,培养出M0、M1和M2亚型,倒置荧光显微镜观察GFP。免疫细胞化学染色法检测巨噬细胞标志蛋白和极化蛋白,并进一步与人脑胶质瘤干细胞SU3共培养。
结果 倒置荧光显微镜下,原始骨髓细胞和条件培养基培养出的M0、M1和M2都发出强烈的绿色荧光。瑞氏-吉姆萨（Wright-Giemsa）染色后,普通显微镜下能观察到巨噬细胞固有的可塑性。免疫细胞化学染色检测CD11C和CD206标志蛋白表达都呈阳性,CD68只在M1巨噬细胞上为弱阳性,CSF-1和CSF-1R在各亚型细胞上都呈强阳性。在共培养的干细胞球体中观察到了绿色荧光细胞浸润,并发生了吞噬反应。
结论 本研究建立了绿色荧光裸小鼠的髓源性巨噬细胞谱系模型,包含M0、M1和M2亚型,都有巨噬细胞固有的可塑性,表达共同的标志蛋白和极化相关蛋白,具有巨噬细胞固有的吞噬功能,可用于与肿瘤细胞之间相生相克表征的研究,特别是需要示踪研究时,可通过巨噬细胞发出的绿色荧光进行识别。

巨噬细胞谱系 荧光示踪 绿色荧光裸小鼠 巨噬细胞极化培养 巨噬细胞标志蛋白 吞噬功能

吴从严 赵海峰;闫可 王为华 吴杰 朱文昱 赵耀东 黄强

南京医科大学附属上海市第一人民医院神经外科； 南京医科大学附属苏州科技城医院病理科；南京医科大学附属苏州科技城医院神经外科；南京医科大学附属苏州科技城医院神经外科研究室；苏州大学附属第二医院神经外科

中华微生物学和免疫学杂志

北大核心、CSCD

2020

/

10.3760/cma.j.cn112309-20191028-00350